ImageJ 免疫荧光量化

宾阳苏打水:
感谢，下次有没有免疫荧光共定位讲课呢？

【回复】回復 @littlemissshine :我理解的是通过设置一个喜欢的threshold来保证被选的杂色是一致的
【回复】请问组织切片单标也是这么分析吗？但是组织切片有杂色怎么处理呀？
WEWE1584:
您好，请问调整threshold时，每张图的阈值需要调成一个数值吗？红色荧光和绿色荧光的阈值需要相同吗

【回复】我相同荧光的调成相同的了，不同荧光没有调一致的意义
【回复】回复 @小零空0 : 我是调成相同的了，不然不统一
【回复】您好，请问是否需要吗？
顾未北家的梅子:
你好up主关于活死统计有个问题想请教一下 mean是平均荧光强度 活细胞染出来的不是点状而是整个细胞形态 所以活细胞的荧光占比肯定是会比死细胞点状荧光占比高很多的 所以导致最后统计出来明明肉眼看死细胞比例很高 但是计算出来MEAN值远远小于活细胞 为什么不是计算个数呀

【回复】细胞活死的定量和其他一些荧光染色实验的定量我觉得有些不同，不同的地方在于细胞活死应该是统计细胞个数的，因为对于死细胞的红色荧光来说，不管强弱它都是按照死细胞计算的。如果是按照Mean来计算的话，对于面积一样的各组来说，荧光的强弱就会影响最终的结果。按照细胞数目还有一个需要注意的地方就是，细胞密度要大致相同，这样结果才能准确。个人愚见，欢迎讨论[呲牙]
凌峭微冷:
UP主，请问您是如何同时打开5张图的呢？用PS软件组合？

【回复】我用windows的画图，win11最新版叫小画家[笑哭]就是小时候电脑画画那个软件
远方yqh:
我也框了一个矩形，移动矩形测量，但是我的area总是在变是咋回事安

【回复】回复 @爆辣辣椒酱 : 不要勾选limit to threshold
【回复】回复 @bili_28419968607 : 解决了，有用
煮酒烧红叶呀:
为什么我测出来的Area面积不一样大呀，明明都是同样大小的图片需要设定什么吗

【回复】我的也是，后来我发现好像如果不像up主那样选框勾选特定区域的话出的面积好像是带有荧光的面积，如果要是全图的话就选框把全图框上，不知道是不是这个原因
【回复】回复 @倪莫客 : 解决了吗
【回复】回复 @智慧女孩不秃头4 :解决了吗
奶膘丶:
大佬，其请问单标的结果怎么办啊，也是这样测平均灰度值，然后每个组的就是它的阳性/DAPI的灰度值吗

【回复】回复 @大大的卷卷卷毛 :视野阳性细胞数/视野总细胞数
【回复】我想请教一下，如果我想直接看阳性细胞比例怎么弄啊？也是按照比例来吗？
【回复】回复 @Chaney爱科研爱相声 :谢谢大佬[给心心]
青桔书册:
请问up主，拍照时所有片子的红色的曝光强度和曝光时间、绿色的曝光强度和曝光时间必须要分别保持一致吗

不要抢我包子啦:
感谢！！学会了！！！讲的很详细！！

柠萌月514:
为啥我移动框框的时候出不来那个面积的平均灰度值呀

煮酒而已:
只有一个颜色，不是复合图片，是不是就不用分三个通道 了

青皮红心黑米米:
up你好，我想问，我发现一张图片分通道后，对于同一个阈值算法，红色通道涵盖全了，但是绿色通道没有，对于这种情况我是不可以两个通道分别用一种算法？

黎emmmm:
我的通道工具改成颜色后怎么没有弹出来ok，自动变回去了

派大星得海绵裤:
为什么框选完之后，它的值不动啊，只有一开始选中的值

雨落殤殇:
你好你好，请问up，我有四色，分出来才有三通道怎么办，其次我还有qptiff格式的文件打不开

AWH:
您好，想请问一下，这个活死细胞比例想做统计学分析的话适合用什么方法呢？