临床医生做基础科研——13.WB结果处理

开心doctor:
视频对应PDF链接：https://pan.baidu.com/s/1M7YNEAYDOP0rPe9DX31JNA 提取码：8fc7 PS软件链接：https://pan.baidu.com/s/13rw6qeZhowB5Cb-9nJVnFw 提取码：ffye Image J软件链接：https://pan.baidu.com/s/1VTOXqiQPYMRPyQpMnQ-53w 提取码：lv9a Graphpad Prism 9.7软件链接：https://pan.baidu.com/s/1b76C9IybXVbyyoLj4HOJig 提取码：6olw

【回复】回复 @乐滋滋a :Prism软件的链接已经重新更新，这次应该可以用了，可以去公众号Meddingguan发送“Prism”领取
【回复】回复 @乐滋滋a :emm，那要不你去tb上直接买个破解版的[doge]
【回复】您好，Prism下载后无法使用，需要GC之类的东西
讨厌蟹黄堡的蟹老板:
师兄，太赞了吧，一人血书求出流式细胞术的教程

【回复】回复 @开心doctor :催更流式[呲牙]
医学英语播客:
纯小白想请教一下神仙up，我的实验图片全部来自我的博士师兄，他给了我很多WB的图片，内参蛋白也是βactin，但是整个实验总共有4个蛋白要进行对照，请问可以用同一个内参的图条吗，然后就是相当于要把你视频中的图片和分析图做4遍吗，天哪好麻烦，能弄到一个图上吗？第二问题是人体的做了一遍，还需要把兔子的也要同样做一遍，这个时候怎么验证动物的实验对照结果是符合人的呢？拜托了

【回复】1.能否用同一个内参的条带，取决于是不是在同一张膜上(这个你需要自己做一遍wb，应该就可以体会) 2.对wb结果做统计分析，看在人和兔中的结果是否一致就行
【回复】主要有些内参图片不是像您视频中那样非常完整的都是黑色，有些是白色，不知道能不能用[大哭]
seemyselfworld:
爱了爱了，讲的这么清楚也就算了，还提供PDF，提供PDF也就算了，连软件的网盘都提供了[打call][打call][打call]

田野的泡泡:
优秀二字已经不足以用来表达对你的赞美了[打call][打call][打call]

Double__N:
up主 你好 我想问一下磷酸化和非磷酸化的蛋白怎么比呢[跪了]

【回复】回复 @给我自己起个名字 :你好 请问你解决这个问题了吗…是用磷酸化蛋白的数据除以非磷酸化的数据再除以内参吗[tv_大哭]
【回复】我也想问这个问题！！以及数据所说明的含义是什么呢？
Dr_Simple的夏天:
师兄简直挽救我们这些科研狗于水深火热啊，希望师兄以后可以安排安排细胞实验的内容！

【回复】家人们我是大一新生，刚才有学校科协的师兄来，忠告我要拿空闲时间学编程，请问要学哪些方面，学到什么程度呢？还有科协听说是由师兄带着来审核项目的，请问对以后读研有没有很大帮助呢？（我是广东双一流临床医学）
辣条小园子:
老师，科研好难，深夜发问[脱单doge]每次跑wb对样本数量有要求吗？比如最好要每组3个样本及以上？[脱单doge]但是我有6个组，在一块板上就跑不了，这种情况，可不可以同一块板上每组只跑一个样本？然后把3块板的数据一起统计。[脱单doge]不过这样投稿的话是不是只能算作一次结果，还需要再重复2次呢？

【回复】我也有6个组，可是我没明白开心老师解释的[笑哭][笑哭][笑哭]，八个孔里怎么放的进六组的[笑哭][笑哭]甚至还要重复三遍是吗，那不就需要6*2*3=36个孔来加样本了吗，岂不是做一次实验要四块板
【回复】回复 @开心doctor :好的，那请问这两板的数据可以一起统计吗？
【回复】回复 @辣条小园子 :友友想问一下你这样可以吗，成功投稿了吗，因为每一板单独统计，你得让你的显影内参灰度值差不多，然后就是目的蛋白显影时间也要一样才行吧？
栎金檬:
谢谢，爱上了学习基础实验技术，如果能分享一期关于qPCR及WB重复的问题，包括生物学重复，技术重复这方面的实验设计就更好了[抱拳][抱拳][抱拳]

zhihui-_:
师兄太厉害了，我有个问题想问一下内参蛋白的表达量相差多少以内认为内参是齐的

【回复】肉眼看见齐大小差不多一样黑就行，反正都是要矫正的[OK]
【回复】同问，差不多齐是啥范围
xxxisui:
看到一键就可以导入P值 我崩了 我前几天一个个敲进去快疯了 后悔没早点看到这个视频

【回复】[喜极而泣][喜极而泣][喜极而泣][喜极而泣]
zenosrxf:
请问一下如果有一些杂点可以怎么去除吗

【回复】你好友友，请问解决了吗
zenosrxf:
请问一下如果不用8bit用默认的RGB结果会有什么影响吗

是苏世呀_:
doctor，之前不是说在一条胶不够用的情况下内参和目标蛋白要相互取一半在同一条胶上面吗？ 但是您现在说的和我所看的文献中基本上都是内参一条胶，目的蛋白一条胶，这样不是对比效果不太好吗？ 我好像没说明白...

【回复】内参可以单独跑的，就是单独一块胶，你可以想一下，如果你的目的蛋白分子量有200左右，内参基本都在四五十，那肯定不能放在一块胶上啊，我老师教我的时候就说是可以分开跑的，只要上的蛋白样本是一样的，毕竟他只是一个内参
【回复】之前UP说的是在一条胶不够用的情况下，对照组和实验组要各取一半在同一条胶上面，不是目的蛋白和内参
【回复】回复 @万能的神阿 :好的谢谢
每名蝴蝶结:
找了半天自动添加显著性差异的带星星的都让我～～原来prism9版本可以 谢谢up主，下载啦

【回复】回复 @开心doctor :小哥哥 想问一下wb蛋白表达差异统计学用均数+/-标准差，或者标准误差是不是都可以呀，都能说明问题就行？
【回复】回复 @每名蝴蝶结 :我想也查一下怎么计算统计学显著性？